TEKNIK PENYIAPAN VAKSIN DOUBLE-STRANDED RNA (dsRNA) VP 15 DENGAN METODE PEMANASAN BAKTERI

Abstract

Double-stranded RNA (dsRNA) merupakan suatu produk dari teknologi RNA interference (RNAi) untuk meningkatkan resistensi udang windu. Sebelum vaksin dsRNA diaplikasikan pada udang windu, perlu dilakukan persiapan vaksin dsRNA. Penyiapan bahan vaksin dsRNA dilakukan dengan metode pemanasan bakteri pada suhu 80°C. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui waktu pemanasan yang mampu mematikan bakteri tanpa merusak konstruksi gen VP-WSSV yang merupakan bahan vaksin dsRNA. Percobaan ini dirancang menggunakan waktu pemanasan yang berbeda, yaitu: 5, 10, 15 menit, dan sebagai kontrol digunakan kultur bakteri tanpa pemanasan. Verifikasi dilakukan dengan penumbuhan kembali bakteri setelah pemanasan pada media Luria Bertani (LB). Selain verifikasi melalui penumbuhan kembali bakteri, analisis juga dilakukan melalui isolasi plasmid DNA dan deteksi gen VP-15 dengan teknik PCR. Hasil kegiatan menunjukkan pemanasan pada suhu 80ºC selama 5-15 menit mampu mematikan bakteri tanpa merusak plasmid DNA dari VP-15.