UJI OPTIMASI MONOKLONAL ANTIBODI Vibrio harveyi DENGAN METODE ELISA

Abstract

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kondisi optimum metode ELISA sebagai alat diagnostik menggunakan monoklonal antibodi V.harveyi. Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kesehatan Ikan dan Lingkungan Balai Penelitian dan Pengembangan Budidaya Air Payau meggunakan plat mikro 96 sumuran berbahan polisterin  sebanyak 2 buah. Perlakuan yang diujikan adalah konsentrasi monoklonal antibodi yaitu; 1:25, 1:50 dan 1:100 dan konsentrasi konjugat 1:500,1:1000,1:2000 dan 1:4000 dengan coating plate suhu inkubasi 4oC dan suhu ruangan semalam. Masing-masing  perlakuan diulang 4 kali. Hasil uji optimasi menunjukkan nilai kerapatan optik yang terbentuk pada setiap perlakuan berbeda pada setiap konsentrasi yang diuji pada pembacaan panjang gelombang 405 nm. Pada konsentrasi monoklonal antibodi 1:25 kerapatan optik yang terbentuk  lebih rendah dibanding konsentrasi 1:50 dan 1:100 pada semua konsentrasi konjugat yang diujikan baik pada coating plate suhu 4oC maupun pada suhu ruang. Perbedaan kerapatan optik yang terbentuk karena perbedaan suhu inkubasi, penggunaan monoklonal antibodi yang dilekatkan pada pelapisan pertama permukaan plat mikro 96 sumuran dan penggunaan konsentrasi konjugat yang berbeda. Suhu inkubasi coating plate 4oC lebih baik dibanding suhu ruangan pada semua konsentrasi monoklonal antibodi dan konjugat yang diuji. Monoklonal antibodi yang dihasilkan pada penelitian ini memiliki kemampuan untuk diagnosis V.harveyi secara ELISA dengan nilai optimal konsentrasi monoklonal antibodi 1:50 penggunaan konjugat 1:500 pada coating plate suhu 4oC.